產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱：過氧化氫酶(CAT)試劑盒-可見顯色法品牌

規(guī)格：48樣 96樣 96樣 196樣

貨號：AS002

檢測方法：可見分光光度法 微板法 可見分光光度法 微板法

產(chǎn)品分類：氧化應(yīng)激系列

貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個月

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。

AIPL1    遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體    

AIRE    免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體    

phospho-AKT1 (Ser473)    磷酸化蛋白激酶AKT1抗體    

phospho-AKT1 (Thr72)    磷酸化蛋白激酶AKT1抗體    

phospho-AKT1 (Tyr326)    磷酸化蛋白激酶AKT1抗體    

ALDH1A2    乙醛脫氫酶2型抗體    

ALDH9A1    γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體    

AGPS    衰老相關(guān)蛋白5抗體    

phospho-alpha B Crystallin (Ser59)    磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體    

AMBN    釉基質(zhì)蛋白抗體    

phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)    磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體    

phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)    磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體    

phospho-Androgen Receptor (Ser515)    磷酸化雄激素受體抗體    

phospho-Androgen Receptor (Ser791)    磷酸化雄激素受體抗體    

phospho-Androgen Receptor (Ser94)    磷酸化雄激素受體抗體    

phospho-Androgen Receptor (Tyr363)    磷酸化雄激素受體抗體    

ANKK1    錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體    

phospho-alpha Adducin (Thr445)    磷酸化內(nèi)收蛋白抗體    

HB-PET Auto Express Medium    

即用型平板培養(yǎng)基    

平板計(jì)數(shù)瓊脂平板（9cm）    10個/包    國際標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂，含糖，用于細(xì)菌總數(shù)的測定    

Plate Count Agar    

營養(yǎng)瓊脂平板（9cm）    10個/包    細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用    

Nutrient Agar    

血平皿（9cm）    10個/包    用于一般細(xì)菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗(yàn)    

Blood Agar Plates    

哥倫比亞血瓊脂平板（9cm）    10個/包    用于營養(yǎng)要求高細(xì)菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗(yàn)    

Columbia Blood Agar    

巧克力瓊脂平板（9cm）    10個/包    用于嗜血桿菌、奈瑟氏菌分離培養(yǎng)    

Chocolate Agar    

伊紅美藍(lán)瓊脂平板（9cm）    10個/包    弱選擇性培養(yǎng)基、用于分離腸道致病菌，特別是大腸桿菌    

Eosin-Methylene Blue Agar    

SS瓊脂平板（9cm）    10個/包    用于沙門氏菌、志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)    

Salmonella Shigella Agar    

HE瓊脂平板（9cm）    10個/包    用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)    

Hektoen Enteric Agar    

XLD培養(yǎng)基平板（9cm）    10個/包    選擇性培養(yǎng)基，主要用于分離志賀氏菌屬，亦可用于分離沙門氏菌    

Xylose Lysine Desoxycholate Medium    

過氧化氫酶(CAT)試劑盒-可見顯色法品牌亞硫酸鉍瓊脂平板（9cm）    10個/包    用于沙門氏菌的選擇性分離    

Bismuth Sulfite Agar    

中國藍(lán)瓊脂平板（9cm）    10個/包    弱選擇性培養(yǎng)基，用于腸道致病菌的選擇性分離    

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。